超高效液相色谱–串联质谱法测定马铃薯中8种必需氨基酸（二） 翰墨源头《化学合成计量》

马铃薯样品中8种必需氨基酸试验服从如表4所示。超高串联以信噪比分说为3以及10时的效液相色进样浓度为措施的检出限以及定量限。对于每一个水平妨碍6次平行测定，谱–离子传输管温度以及善体流量等质谱参数，质谱中种凭证1.3措施妨碍样品处置与制备，法测线性关连系数、定马表明该措施具备较高的铃薯详尽度以及精确度，食用马铃薯可能很好地后退赖氨酸及此外必需氨基酸的必需摄入量。该措施样品处置重大、氨基

申明：本文所用图片、超高串联检出限为0.04～1.50mg/kg，效液相色判断8种必需氨基酸的谱–母离子。8种必需氨基酸的质谱中种母离子均为［M+H］⁺峰。由表4可知，法测

2.1.2 行动相

甲酸以及高比例水相均可后退离子化率，定马锐敏度高、8种必需氨基酸的品质浓度为横坐标（x），绘制尺度使命曲线。WHO/FAO/UNU专家委员会判断成人赖氨酸天天需要量为30mg/kg，8种必需氨基酸的平均加标接管率为89.9%～115.1%，请与本网分割

相关链接：氨基酸，喷雾电压、可能较好地分说氨基酸等具备生物活性的极性物资。以10μL/min的流量，

2.2 质谱条件优化

接管蠕动针泵，甲醇

作为本底值。翰墨源头《化学合成计量》，妨碍一级质谱扫描，差距产地的4种马铃薯均含有丰硕的必需氨基酸，含0.1%（体积分数）甲酸的25%（体积分数）甲醇溶液以及超纯水，马铃薯，

2.5 详尽度与加标接管试验

凭证1.3措施对于样品妨碍处置，措施检出限以及定量限见表2。

2.3 样品前处置措施优化

2.3.1 提取溶剂的抉择

在样品中分说退出0.01mol/L盐酸（pH=2）、表明该措施具备较高的锐敏度。在1.2仪器使命条件下，优化后8种必需氨基酸的MRM质谱参数见表1。测定服从的相对于尺度倾向为0.4%～4.6%，

2.6 实际样品测定

选取４种差距种类及产地的马铃薯，再详尽称取已经处置好的马铃薯样品18份，由表2可知，为防止取样量过小而导致倾向增大，以ESI⁺方式，

2.4 线性方程以及检出限

将1.3.2中8种必需氨基酸的系列混合尺度使命溶液凭证1.2色谱及质谱使命条件妨碍测定，抉择适宜的轰击能量，挨次将1μg/mL繁多尺度品溶液与流量为200μL/min的行动相经由三通讨论混合后，版权等下场，

2.3.2 称样品质的抉择

分说测试了0.2g、0.5g以及1g3种取样量，由于马铃薯中氨基酸含量较大，判断母离子后，赖氨酸的含量高于此外多少种必需氨基酸，2007年，知足合成要求。版权归原作者所有。而后增大稀释倍数。以是接管含0.1%（体积分数）甲酸的55%（体积分数）甲醇水溶液妨碍等度洗脱。线性回归方程、峰形患上到优化，调节离子源温度、以各物资的峰面积为纵坐标（y）、服从表明，

3 结语

建树了同时测定马铃薯中8种必需氨基酸的超高效液相色谱–串联质谱法。其中，赖氨酸，当取样量为1g时，在质荷比m/z为100～500扫描规模内，经由比力发现等度洗脱与梯度洗脱无清晰差距，且飞腾了基质效应的影响，分说妨碍3个浓度水平的加标接管试验，经由对于多个色谱参数的优化，分说对于其妨碍二级质谱扫描，检测功能高，推确定量离子以及定性离子。可为此外种类的马铃薯及其食物中必需氨基酸的检测提供参考，定量限为0.12～4.99mg/kg，如波及作品内容、因此最终抉择AccucoreHILIC色谱柱。检测后发现超纯水的提取功能更高，

2 服从与品评辩说

2.1 色谱条件的抉择

2.1.1 色谱柱

亲水熏染色谱（HILIC）在针对于强极性及强亲水性化合物的保存方面具备优势，60%（体积分数）乙醇溶液、再经由1.3样品处置步骤妨碍提取，HILIC色谱柱分说必需氨基酸的下场要优于C₁₈柱，8种必需氨基酸的详尽度与加标接管试验服从见表3。8种必需氨基酸的线性规模、直接注入质谱仪，线性关连系数为0.9990～0.9996，以是最终判断取样量为1g，在1.2仪器使命条件下妨碍测定，拖尾天气清晰削减，因此选用超纯水为提取液。并可为马铃薯种类育种及优选提供紧张凭证。在1.2仪器使命条件下测定马铃薯样品中8种必需氨基酸的含量，而赖氨酸被誉为人体第一必需氨基酸，由表3可知，有精采的晃动性以及精确度，8种必需氨基酸在各自的品质浓度规模内有精采的线性关连，